| |
Главная
|
Приготовление конъюгированных антигеновКонъюгаты ДНФ-белок Конъюгаты гаптен — белок используются для получения специфических АТ (антитело) к гаптену. Существует большое количество способов присоединения гаптена к белку-носителю. Часто для этой цели применяют диазопроизводные ароматических соединений. Можно вводить 2,4-динитрофенильные или 2,4,6-динитрофенильные группы в состав белков при помощи соответствующих сульфонатов. Пенициллин обладает способностью реагировать in vivo с белками, что может быть причиной развития повышенной чувствительности к пенициллину, которая обусловлена пенициллоил-лизиновой группой. Пенициллоил-конъюгаты получают в препаративных количествах с небольшим выходом побочных продуктов (см. рисунок). Пенициллоильные конъюгаты
Для получения конъюгатов используют бифункциональные реагенты, например, карбодиимиды или диизоцианаты — для получения конъюгатов пептидов и нуклеотидов с белками. Диизоцианаты реагируют со свободными аминогруппами. Часто используемым реагентом является толуол-2,4-диизоцианат, изоцианатные группы которого обладают различной реакционной способностью. Реакцию с толуол-2,4-диизоцианатом проводят в два этапа: вначале диизоцианат присоединяют к пептиду, а затем, удалив избыток лиганда, присоединяют пептид к белку. Меченные ферментом АТ (антитело) используются в цитохимии для выявления антигенов (1); меченные ферментом АТ (антитело) и АГ находят применение в ИФА, где они позволяют выявлять антигены, антитела и гаптены в количестве нескольких нанограммов (6). Меченный таким образом протеин А представляет собой универсальный реагент для ИФА. |
